細胞培養(yǎng)中的各種問題解答

細胞培養(yǎng)中的各種問題解答
 
在培養(yǎng)細胞的過程中，或許你會有一系列的問題想要問。今天為大家整理了一些關(guān)于細胞的常見問題解答。
 
一、細胞成長曲線測守時為什么要做重復(fù)孔？
答：測定細胞成長曲線細胞計數(shù)時挑選 3 個復(fù)孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作差錯。
 
二、為什么制作的細胞成長曲線沒有到達平臺期？
答：可能有以下原因：一是細胞接種密度過低；二是細胞培育時刻過短；三是細胞成長狀況欠好，使其不能正常增殖。
 
三、怎么挑選細胞接種數(shù)？
答：可根據(jù)細胞傳代培育過程中接種數(shù)及細胞成長周期進行核算，細胞接種數(shù)因細胞的不同而不同。
 
四、細胞計數(shù)時為什么要用臺盼藍染色？
答：參加臺盼藍后，活細胞不上色，臺盼藍上色的細胞呈深藍色，是不健康或已死亡的細胞，不能計數(shù)。
 
五、測定細胞成長曲線的含義是什么？
答：細胞成長曲線是測定細胞肯定成長數(shù)的常用辦法，也是斷定細胞生機的重要目標(biāo)，是培育細胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)。由于細胞太小，無法測單個細胞的成長狀況，所以測細胞集體的成長曲線。
 
六、細胞成長曲線測定周期是幾天？
答：一般是一個星期。
 
七、細胞成長曲線還有其他辦法制作嗎？
答：當(dāng)然有。我們說到zui多的是直接計數(shù)的辦法，除此以外還有相對計數(shù)的辦法，該類辦法首先要制作規(guī)范曲線，標(biāo)定細胞數(shù)和某個變量的函數(shù)，然后我們只需要測定每天這個變量的值便能夠核算出細胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。
 
八、為什么細胞計數(shù)多天，細胞數(shù)沒有添加反而削減？
答：一般細胞傳代后，會有一個成長緩慢的潛伏期，細胞不增殖，而細胞會有正常的死亡，故細胞數(shù)不添加反而削減。